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FC酶標(biāo)儀的原理
酶標(biāo)儀實際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔板中的待測標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號,電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算,后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。
酶標(biāo)儀的分類
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍(lán)紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。
隨著檢測方式的發(fā)展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強(qiáng)度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學(xué)發(fā)光(Lum)。
酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長,而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取特定波長進(jìn)行檢測。
酶標(biāo)儀的檢查測試
1、檢測電源部分的輸出電壓
電源部分輸出電壓可以通過檢測MUSCU板上X11元件得到,每個點的正確對地電壓應(yīng)該是(順序為從左至右):5V、0V(地電壓)、15V、24V、-15V、0V。
2、光源電壓的測試和調(diào)節(jié)
測量光源電壓,如果發(fā)現(xiàn)所測的結(jié)果不符合規(guī)定要求可以調(diào)節(jié)電源上的R39元件。其操作步驟如下:
⑴打開電源開關(guān),使儀器處在工作狀態(tài)。
⑵用電壓表測量光源電壓,正常電壓應(yīng)在6.7~6.9V之間。
⑶選擇405nm波長的程序,按“開始”鍵,同時測量光源處電壓,正常值應(yīng)在7.5~8.1V之間。
⑷如果光源電壓不正常,關(guān)閉電源開關(guān)。旋松測量部分上蓋螺絲并移去上蓋。
⑸旋松軌道部分的固定螺絲并移動軌道部分(要特別小心以防損傷軌道部分和主板及電源部分的連線!),能看到軌道下面的電源即可。
⑹打開電源開關(guān),調(diào)節(jié)電源上R39元件,再重復(fù)上面步驟2測量光源電壓,一直到正確為止。
酶標(biāo)儀的檢驗
1、重復(fù)性:在一定條件下所獲得的獨立的測定結(jié)果之間的一致性程度即可重復(fù)性,可用CV值來表示。在某一特定的濾光片下測定某一塊酶標(biāo)板20次,用統(tǒng)計學(xué)方法求出所有測量值的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。公式如下:
所有測量值的標(biāo)準(zhǔn)差
CV%=————————————×所有測量值的均值
2、準(zhǔn)確性:待測物的測定值與一可接受的參考值之間的差異。此項指標(biāo)需用雷勃公司標(biāo)準(zhǔn)板(PVT)來測。
測量值-參考值
準(zhǔn)確性=——————————×參考值
3、光路檢測:將一塊酶標(biāo)板正放測量一次,再將酶標(biāo)板反放測量一次,查看同一孔吸光值是否相同,從而查看其所有光路8通道是否均一。
⑴查看光路上的透鏡是否清潔。
⑵燈泡好否及亮度是否正常。
⑶濾光片是否清潔。
4、載軌運動:開機(jī)后酶標(biāo)儀能否自檢,自檢結(jié)束后撳“開始”,查看載軌運動是否正常及有無噪聲。
5、按鍵膜的好壞:開機(jī)后試用所有按鍵膜,查看其功能是否完好。