盡管實(shí)踐已經(jīng)證明了吸收技術(shù)測量葉綠素含量的有效性,但該方法對樣品的要求較高,使其應(yīng)用范圍受到限制。而樣品本身的葉綠素?zé)晒鈩t不受樣品厚度、均一性等的影響,可以指示葉綠素的含量。根據(jù)這個(gè)原理,Gitelson等比較了葉片的吸收和反射對葉綠素?zé)晒獾挠绊懀l(fā)現(xiàn)在735nm和700nm處的比值與葉片的反射相關(guān)性最高,并且當(dāng)樣品葉綠素含量在41 mg· m-2到675 mg· m-2時(shí),F(xiàn)735/F700的比值與其葉綠素含量間存在著顯著的線性關(guān)系(R2≥0.95),與傳統(tǒng)的吸收性測量方法相比(測量范圍≤300 mg· m-2),提高了葉綠素含量的線性關(guān)系范圍。
根據(jù)Gitelson的研究結(jié)果,CCM-300使用具有15nm半峰寬的460nm二極管用于熒光激發(fā),提高了紅色熒光波長,避開了大約685nm的發(fā)射熒光峰(葉綠素可重新吸收,降低測量精度)。儀器使用在735nm和700nm的葉綠素發(fā)射熒光的比率(F735/F700)進(jìn)行葉綠素含量的測量,讀數(shù)為F735/F700的比值以及根據(jù)Gitelson方程計(jì)算的葉綠素含量。
葉綠素含量測量儀
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