盡管實踐已經證明了吸收技術測量葉綠素含量的有效性,但該方法對樣品的要求較高,使其應用范圍受到限制。而樣品本身的葉綠素熒光則不受樣品厚度、均一性等的影響,可以指示葉綠素的含量。根據這個原理,Gitelson等比較了葉片的吸收和反射對葉綠素熒光的影響,發現在735nm和700nm處的比值與葉片的反射相關性最高,并且當樣品葉綠素含量在41 mg· m-2到675 mg· m-2時,F735/F700的比值與其葉綠素含量間存在著顯著的線性關系(R2≥0.95),與傳統的吸收性測量方法相比(測量范圍≤300 mg· m-2),提高了葉綠素含量的線性關系范圍。
根據Gitelson的研究結果,CCM-300使用具有15nm半峰寬的460nm二極管用于熒光激發,提高了紅色熒光波長,避開了大約685nm的發射熒光峰(葉綠素可重新吸收,降低測量精度)。儀器使用在735nm和700nm的葉綠素發射熒光的比率(F735/F700)進行葉綠素含量的測量,讀數為F735/F700的比值以及根據Gitelson方程計算的葉綠素含量。
葉綠素含量測量儀
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